EdU细胞增殖检测试剂盒BeyoClick™EdU细胞增殖检测试剂盒(DAB法)(BeyoClick™EdUCellProliferationKitwithDAB),是一种基于DNA合成过程中胸腺嘧啶脱氧核苷(thymidine)类似物EdU(5-ethynyl-2-deoxyuridine)的掺入,并通过随后的点击反应(Clickreaction)使EdU被生物素(Biotin)所标记,然后加入的辣根过氧化物酶标记链霉亲和素(HRP-Streptavidin)与生物素结合,再然后通过DAB显色,从而实现简单、快速、高灵敏地检测细胞增殖的试剂盒。上海东寰与您分享EdU细胞增殖检测试剂盒的重要性。湖南咨询EdU细胞增殖检测试剂盒公司
通过基于EdU与荧光染料的特异性共轭反应,把荧光集团标记到新合成的含有EdU的DNA上面,这样就可以进行高效快速的检测出DNA复制活性,广泛应用于细胞增殖、细胞分化、生长与发育、DNA损伤修复等方面的研究。EdU标记(a)将细胞完全培养基中按照500:1的比例加入EdU溶液,制成2xEdU标记培养基;(b)提前将2xEdU标记培养基预热,然后等体积加入到细胞原有培养基中,获得lxEdU溶液,其中EdU的终浓度为10uM;注:1)我们不建议替换全部培养基,因为这样可能会影响细胞增殖的速度;2)配置好的培养基建议现用现配,用量以没过细胞为宜;(c)每孔加入300ul含EdU培养基孵育细胞2小时,弃培养基;注:1)培养时间取决于细胞的增殖速度和生长状态;2)大多数**细胞以及粘附细胞系均可采用2小时的孵育时间(d)以lxPBS清洗细胞两次,毎次5分钟,以除去未掺入DNA的EdU残留。湖南咨询EdU细胞增殖检测试剂盒公司上海东寰告诉您EdU细胞增殖检测试剂盒哪家好?
保存条件:-20℃保存,一年有效。BiotinAzide、DAB显色液A和DAB显色液B须避光保存。注意事项:ClickAdditive配制成溶液后请注意适当分装。如果溶解后有白色物质析出,请上下颠倒多次,待全部溶解后使用。如果该溶液颜色变成棕色,说明该组分的有效成分已失效,请弃用。DAB对人体有害,操作时请小心,并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。由于本产品需要铜离子催化进行点击反应,请注意如下的兼容性问题及解决方案。本产品完全兼容有机类染料如AlexaFluor®系列普通染料及fluorescein(FITC)、Allophycocyanin(APC)及APCE-tandems染
本试剂盒使用便捷、兼容性好。本试剂盒只需常用的多聚甲醛固定和TritonX-100穿透,就可以使叠氮化物探针有效进入细胞并发生点击反应,不会影响细胞形态,不会影响基于抗体的免疫荧光和免疫组化检测,也不会影响DNA的荧光染色(如PI染色检测细胞周期、DAPI或Hoechst染料检测细胞核)。而BrdU法为了使大分子的BrdU抗体进入细胞并与DNA上的BrdU结合,需要对双链DNA进行变性处理(如酸变性、热变性或者DNase消化等),这种变性可能会影响细胞形态,影响后续的免疫荧光和免疫组化检测、DNA的荧光染色等。BrdU法和BeyoClick™EdU法检测原理的比较参见图2。上海东寰告诉您如何正确使用EdU细胞增殖检测试剂盒?
可通过CellProliferationELISA,BrdU(比色法.)或CellProliferationELISA,BrdU(发光法)进行细胞群落中DNA合成测定(BrdUbased)。优点是:实验结果同增殖细胞数目紧密相关,可一步完成细胞的温和固定和变性,操作方便稳定,不破坏细胞形态。5-Bromo-2´-dULabeling/DetectionKitI(荧光法)或KitII(AP)可使用试剂盒提供的BrdU单抗,以及酶或荧光偶联二抗,检测单细胞水平的DNA合成(BrdUbased)。前者通过免疫荧光检测,后者通过荧光显微镜检测。优点是:使用核酸酶变性DNA,在不伤害细胞完整性的情况下使抗体结合BrdU。EdU细胞增殖检测试剂盒给社会带来了什么好处?湖南咨询EdU细胞增殖检测试剂盒公司
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快速—–无需过夜,省却抗原抗体反应。整个检测过程只需2.5小时,缩短实验周期。准确—–标记率高且无需DNA变性(酸解、热解、酶解等),可有效避免变性带来的样品损伤,确保细胞核边缘清晰完。灵敏—–无需抗体,检测染料为BrdU抗体的1/500,更容易扩散,即使单个增殖细胞也能准确检测。兼容—–对样品几乎无损伤,允许与多种抗体或荧光蛋白同时标记,能够同时检测细胞其他性状特征。本试剂盒适用于培养的细胞或组织样品,也适用于组织切片,可以检测到细胞或组织样本中的单个增殖细胞,也可以对细胞或组织样本总体的细胞增殖情况进行定量分析。湖南咨询EdU细胞增殖检测试剂盒公司