低毒性PEI转染试剂配置方法

对于某些类型的细胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS细胞，在转染前两天铺板可显著提高转入基因的表达水平。如果选择转染前两天铺板，可适当降低铺板密度，以确保转染时细胞的汇合度仍为70~80%。2.对于接触抑制敏感的细胞，可适当降低铺板密度。3.即使在有蛋白（如10%的血清）存在的情况下，DNA-PEI复合物仍能转染细胞，但是DNA-PEI复合物必须在无蛋白存在的条件下形成。我们推荐使用Opti-MEMITM培养基以达到*转染效率。其他的无蛋白培养基则需测试与线性PEI转染试剂的兼容性。更多关于PEI转染试剂相关产品技术问题，欢迎咨询上海曼博生物!也欢迎关注我们的公众号：Mine-BioPEI转染试剂在使用时出现沉淀的原因是什么？低毒性PEI转染试剂配置方法

接种细胞：转染前，用胶原酶（WORTHINGTONG公司LS004196)消化细胞并计数（不建议用胰酶）。调整细胞浓度，将细胞铺入细胞培养的器皿，每个孔置入的细胞量应能使转染时细胞汇合度达到70~80%。2.准备DNA-PEI复合物：DNA、PEI试剂和稀释剂在进行以下步骤前需先使其升至室温。依据表1所示，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他适合的无蛋白培养基稀释适量DNA。用同样的培养基稀释PEI试剂。每1μgDNA需用1.5-5μL线性PEI转染试剂(这个需要客户自行摸索配比，每一批转染试剂和每一批DNA比例可能会稍有不同）。一边轻轻涡旋装有DNA溶液的试管，一边将稀释的线性PEI转染试剂滴加至试管中（注意：请勿颠倒添加顺序）。充分混匀后，室温静置10~25min以形成DNA-PEI复合物。当溶液体积较大时，请用圆底聚丙烯管，例如NEST5mL/14mL离心管。3.转染细胞：直接向每个孔中加入DNA-PEI复合物并轻轻涡旋培养板/培养皿。在无血清条件下转染时，去除生长培养基，替换成无血清培养基，然后滴DNA-PEI复合物。转染1.5h后，添加½体积的包含30%血清的生长培养基。更多关于转染试剂相关产品问题，欢迎咨询上海曼博生物！低毒性PEI转染试剂配置方法哪个品牌的PEI转染试剂性价比更高？

材料：质粒DNA指数生长的真核细胞PEI（聚乙烯亚胺）1×HBS（pH7.4）配方：PEI储存液（100μM）：称取125mgPEI粉末溶解于50ml1×HBS（pH7.4）中，0.2μm滤膜过滤，储存于4℃备用。1×HBS（pH7.4）：将8.76gNaCl溶解于900ml超纯水，加入20ml1M的HEPES，调pH值到7.4，定容至1L，过滤（0.2μm滤膜）后储存于4℃备用。方法：1．细胞分盘：通过胰酶消化收集细胞，用适当的完全培养基以4×105至8×105细胞/cm2的密度平铺细胞于60mm组织培养皿上（根据实验需要选择培养皿，使细胞贴壁后所占总面积达到培养皿面积的70-90％）。根据细胞贴壁情况于含5％CO2的37℃温箱中孵育8-24h,当细胞贴壁完全后即可开始转染。转染前换入2mL预热的无血清培养基。更多关于PEI转染试剂相关产品技术问题，欢迎咨询上海曼博生物。

如想申请PEI试用装，请关注我们的公众号：Mine-bio，回复关键词“PEI申请”，即可参加！

产品特点：PEIMAX40K是线性聚乙烯亚胺盐酸盐形式（LinearPolyethylenimineHydrochloride），是线性化聚乙烯亚胺PEI25K的升级产品。相比于PEI25K，PEIMAX40K：1.完全水解（去乙酰化）；2.盐酸盐形式，具更高的水溶特性；3.含更长连续性乙烯亚胺片段，其质子化氮水平比PEI25K提高11%以上。应用领域：PEIMAX40K（cat#24765）是一款非GMP等级的PEI转染试剂，适用于基础学术研究和药物研发早期阶段，以固体粉末形式提供，需用户自行配置（详情见使用方法）。如想申请PEI试用装，请关注我们的公众号：Mine-bio，回复关键词“PEI申请”，即可参加！用PEI转染时，一般和DNA的比例是多少?

抗体药物研发客户提供小众创新产品，包括从Researchgrade到cGMP等级的无动物源培养基质，转染试剂、病毒转导试剂、基因编辑工具等产品和定制服务，支持ATMP（AdvanceTherapyMedicinalProducts）药物研发从R&D到Clinicaltrial以及后期商业化的无缝转化；以及提供药物开发和探索的抗体文库定制和商业授权灵活的CHO工程细胞株以支持抗体药物的商业化生产，以此希望帮助国内科研工作者快速地接触世界范围内的技术，分享研发工具进步带来的技术红利，终为细胞、基因产业以及再生医学行业等乃至整个生命科学行业赋能！更多关于PEI转染试剂相关产品技术问题，欢迎咨询上海曼博生物。PEI转染试剂是一种高分子化学类转染试剂。低毒性PEI转染试剂配置方法

Polysciences PEI和Polyplus的PEI哪个更好？低毒性PEI转染试剂配置方法

稳定转染方法1.接种细胞：转染前，用胶原酶（WORTHINGTONG公司LS004196)消化细胞并计数（不建议用胰酶）。调整细胞浓度，将细胞铺入细胞培养的器皿，每个孔置入的细胞量应能使转染时细胞汇合度达到70~80%。2.准备DNA-PEI复合物：DNA、PEI试剂和稀释剂在进行以下步骤前需先使其升至室温。依据表1所示，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他适合的无蛋白培养基稀释适量DNA。用同样的培养基稀释PEI试剂。每1μgDNA需用1.5-5μL线性PEI转染试剂(这个需要客户自行摸索配比，每一批转染试剂和每一批DNA比例可能会稍有不同）。一边轻轻涡旋装有DNA溶液的试管，一边将稀释的线性PEI转染试剂滴加至试管中（注意：请勿颠倒添加顺序）。充分混匀后，室温静置10~25min以形成DNA-PEI复合物。当溶液体积较大时，请用圆底聚丙烯管，例如NEST5mL/14mL离心管。3.转染细胞：直接向每个孔中加入DNA-PEI复合物并轻轻涡旋培养板/培养皿。在无血清条件下转染时，去除生长培养基，替换成无血清培养基，然后滴DNA-PEI复合物。转染1.5h后，添加½体积的包含30%血清的生长培养基。欢迎关注我们的公众号：Mine-bio ，私信回复关键词“PEI申请“即可申请PEI试用装！低毒性PEI转染试剂配置方法