重组蛋白|蛋白表达服务|技术服务|蛋白酶
在比较BstDNA聚合酶和TaqDNA聚合酶对于复杂DNA片段扩增的适用性时,以下是一些关键点:1.**TaqDNA聚合酶**:-TaqDNA聚合酶因其高热稳定性和扩增效率而被应用于常规PCR。它扩增速度为30-60秒/kb,缺乏3'→5'核酸外切酶活性,无校正功能,易产生错配碱基。-对于结构复杂的模板,如GC含量高、有二级结构等,TaqPlus可以用于扩增,能有效地扩增10kb以下的片段。-有产品如TitaniumTaqDNA聚合酶,它是通过基因工程改造的Taq酶,缺失了5'-3'外切酶活性,具备更强大的扩增性能,适合扩增高度复杂的DNA混合物。2.**BstDNA聚合酶**:-BstDNA聚合酶具有高适温度,能够适应更加苛刻的扩增条件,同时消除DNA二级结构,因而能够准确并且均匀地扩增全基因组序列。-BstDNA聚合酶大片段能够优先扩增短片段的DNA,并且能够确保扩增得到的DNA覆盖了整个基因组,连贯并且无偏地扩增所有的遗传位点。-翌圣生物HieffCanace®PlusHigh-FidelityDNAPolymerase基于PfuDNA聚合酶改造而成,其保真性是Taq酶的83倍,Pfu酶的9倍,扩增速度高达10秒/kb,扩增目的片段长达13kb,具有极强的扩增效率的模板适应性,非常适合复杂模板的高保真扩增。
快速高效的扩增能力AdvanceFastPCRMasterMix采用了改良型的高保真DNA聚合酶,能够在极短时间内完成PCR扩增。其延伸速度可达5秒/kb,甚至在1kb以内的片段需1秒即可完成扩增。这种高速扩增能力缩短了实验时间,提高了科研效率。高保真性与高特异性该产品使用高保真DNA聚合酶,保真性远高于普通Taq酶,能够有效减少扩增错误和非特异性产物。同时,预混液中添加了特异性保护剂,即使在反复冻融后仍能保持稳定的活性。即用型预混液,操作简便AdvanceFastPCRMasterMix(2×)(WithDye)是即用型的2×预混合溶液,包含所有PCR反应所需成分,如高保真DNA聚合酶、dNTPs、优化缓冲体系和电泳指示剂。用户只需加入引物和模板即可进行扩增,简化了实验步骤,减少了人为误差。兼容性强,适用范围广该产品适用于多种类型的DNA模板,包括基因组DNA、质粒DNA和cDNA。此外,其扩增产物为平末端,可直接用于后续的克隆、测序等应用。Recombinant Mouse SEMA3A Protein,His TagUBE2L3在调节NF-κB信号通路中的作用可能对免疫反应和炎症过程至关重要。
一、主要特点:免提取与高兼容性Blood Direct PCR Master Mix (2×) (Without Dye)是一种专为血液样本设计的高效PCR预混液,能够直接从全血或干血斑中扩增DNA,无需进行繁琐的DNA提取和纯化步骤。这种预混液含有高保真DNA聚合酶(如HemoTaq™或Q5® Hot Start High-Fidelity DNA Polymerase),这些酶经过优化,能够耐受血液中的各种抑制剂,包括抗凝剂(如EDTA、肝素、柠檬酸钠)和滤纸中的化学物质。此外,该预混液还具备的模板兼容性,能够从多种抗凝剂保存的血液样本中直接扩增DNA,适用于人类、小鼠等哺乳动物的全血样本。二、性能:高保真性与长片段扩增Blood Direct PCR Master Mix (2×) (Without Dye)的优势之一是其高保真性。其DNA聚合酶的保真性高于普通Taq酶,接近Pfu DNA聚合酶,能够确保扩增产物的准确性。这对于需要高精度的基因克隆和测序实验尤为重要。此外,该预混液能够扩增长达5kb甚至更长的DNA片段,适用于多种复杂的基因组分析。例如,它可以轻松扩增人类基因组中的长片段,如IL-6基因的4882bp片段。
高灵敏度与特异性该试剂盒采用优化的缓冲体系和新一代TaqDNA聚合酶,结合高效的逆转录酶,能够在低浓度RNA样本中实现高灵敏度的检测。其特异性高,即使在复杂的样本中,也能通过熔解曲线分析呈现单一峰,避免非特异性扩增。防污染设计OneStepRT-qPCRSYBRGreenKit(UDGPlus)内置dUTP/UDG防污染系统,能够有效降解含有尿嘧啶的PCR产物,防止实验室气溶胶污染对实验结果的干扰。这一特性在病毒检测和低丰度基因表达分析中尤为重要。操作简便该试剂盒将逆转录和qPCR反应整合在同一管中完成,避免了多次开盖操作,减少了人为误差和污染风险。同时,预混液的设计使得实验操作更加便捷,用户只需加入引物和模板即可进行反应。示踪染料辅助试剂盒中的反应缓冲液含有惰性示踪染料,通过颜色变化(如蓝色与黄色混合后变为绿色)直观判断样本是否加入,提高了实验操作的准确性和可靠性。兼容性该试剂盒适用于多种qPCR仪器,并提供不同浓度的ROX校正染料,以满足不同仪器的需求。在目标蛋白的C末端添加His标签和Avi标签。有助于通过亲和层析进行蛋白纯化,而Avi标签则可以用于生物素。
ExoIII(ExonucleaseIII)和Lambda核酸外切酶(λExonuclease)在DNA末端处理上的主要不同点如下:1.**作用方向**:-**ExoIII**:具有3'→5'外切脱氧核糖核酸酶活性,它从DNA链的3'-OH末端逐步切去单核苷酸。-**Lambda核酸外切酶**:是一种5'→3'核酸外切酶,能选择性地沿5'→3'方向消化5'端磷酸化的双链DNA。2.**底物特异性**:-**ExoIII**:适底物是平末端或5'末端突出的DNA,但也可以作用于双链DNA切刻位点产生单链缺口。由于对单链DNA无活性,因此难以切割3'突出末端。-**Lambda核酸外切酶**:适底物是5'磷酸化的双链DNA,对单链DNA和5'端未磷酸化修饰的DNA的酶切活性较低,不能从DNA的切刻或缺口处起始消化。3.**活性差异**:-**ExoIII**:对具有3'-突出末端(至少有4个碱基,且具有3'-末端C残基)的DNA、单链DNA、硫代磷酸酯连接的核苷酸无活性。-**Lambda核酸外切酶**:对5'-OH端的切割速度比5'-P端慢约20倍;对单链DNA的酶切速度比双链DNA慢约100倍。4.**应用场景**:-**ExoIII**:可以用于生产特定方向的单链DNA,将线性化DNA设计成为一端为不切割末端(3'突出端),另一端则设计为易切割末端(平端或5'突出端)。
Pfu DNA Polymerase在分子进化研究中的应用:Pfu DNA Polymerase用于分子进化研究,确保DNA序列的准确复制。Recombinant Mouse SEMA3A Protein,His Tag
不同的DNA聚合酶在PCR中的应用差异主要体现在以下几个方面:1.**TaqDNAPolymerase**:是常用的DNA聚合酶之一,来源于Thermusaquaticus,具有较高的热稳定性及扩增效率。但它缺乏3'-5'核酸外切酶活性,即没有校正功能,因此其保真性相对较低。Taq酶适合扩增较短的DNA片段(通常不超过3kb),且在PCR产物的3'端带A碱基,可直接用于TA克隆。2.**PfuDNAPolymerase**:来源于Pyrococcusfuriosus,是一种高保真聚合酶,具有3'-5'外切酶活性,可以修复并纠正PCR反应中的腺嘌呤碱基误配,有效防止误差累积。Pfu聚合酶适用于需要高度准确的PCR扩增和DNA测序。3.**VentDNAPolymerase**:来源于Thermuslitoralis,具有中等保真度,比Taq聚合酶高两倍。它适用于GC含量高或复杂序列的PCR扩增,具有较高的热稳定性,半衰期可达6.7小时。4.**KODDNAPolymerase**:来源于Thermococcuskodakaraensis,具有高保真性和高热稳定性,保真性是Taq的约50倍,同时具有合成速度快的特点,聚合速度约为普通PfuDNAPolymerase的5倍,特别适合于高保真地扩增6kb以内的PCR产物。Recombinant Mouse SEMA3A Protein,His Tag
浦斯瑞(上海)生物医药有限公司
联系人:姜自军
联系手机:18516664530
联系电话:021-39922173
经营模式:服务型
所在地区:江苏省-苏州市-昆山市
主营项目:重组蛋白|蛋白表达服务|技术服务|蛋白酶
Recombinant Mouse SEMA3A Protein
Recombinant Human CD52 Protein
Recombinant Human CLEC2D Protein
Recombinant SARS-COV-2 Spike S1 (Omicron)(His Tag)
Recombinant Human SIRP alpha V5 Protein
Recombinant Human MSLN/Mesothelin(hFc Tag)
TAT peptide
Recombinant Human FDPS Protein
Recombinant Human PS20 Protein
Recombinant Mouse TIMP1 Protein