重组人血清白蛋白(rHSA)是通过植物表达系统生产的细胞培养级产品,在科研领域有着广泛的应用。以下是rHSA在科研中的一些主要应用:1.**细胞培养**:rHSA是细胞培养中的重要成分,它可以作为血清替代品,促进细胞生长和维持细胞培养环境的稳定性。由于其无动物源成分,可以减少血清中可能存在的病毒污染风险,适用于需要高生物安全性的细胞培养研究。2.**药物载体**:rHSA因其良好的生物相容性和药物结合能力,被用作药物载体,有助于提高药物的稳定性、延长药物的半衰期,并可能改善药物的靶向性。3.**疫苗保护剂**:在疫苗开发中,rHSA可以用作保护剂,有助于提高疫苗的稳定性和有效性。4.**细胞冻存保护剂**:rHSA在细胞冻存过程中起到保护作用,有助于提高细胞复苏后的存活率。5.**医疗器械包埋剂**:在医疗器械领域,rHSA可以作为包埋剂,用于药物洗脱支架或其他植入式医疗设备。6.**生物制药**:rHSA在生物制药生产中作为稳定剂和保护剂,有助于提高蛋白质药物的稳定性和疗效。7.**基因**:在基因领域,rHSA可能被用作基因载体,帮助基因传递至目标细胞。8.**化妆品添加剂**:在化妆品行业,rHSA可能因其保湿和修复特性而被用作添加剂。尽管Ultra-Long Master Mix设计用于长片段扩增,但在某些情况下,可能出现非特异性扩增,需要通过优化引物。Recombinant Human MANF
在蛋白质糖基化分析中,除了N-糖苷酶F(PNGaseF),还有其他几种酶也发挥着重要作用,具有各自的优势:1.**EndoH糖苷内切酶H**:这种酶可以水解高甘露糖型N-连接糖链,通常用于区分高甘露糖型和复杂型糖链。2.**EndoS糖苷内切酶S**:EndoS能够从IgG重链的壳二糖结构之间切除N-连接糖,有助于分析抗体的糖基化模式。3.**FastPNGaseF**:这是一种经过优化的PNGaseF,能在数分钟内对抗体、免疫球蛋白、融合蛋白以及其他糖蛋白进行彻底和快速的去糖基化,简化了实验流程,同时保持了灵敏度和重复性。4.**O-糖苷酶O-glycosidase**:用于去除O-连接的糖链,这对于O-糖基化蛋白质的分析至关重要。5.**三氟甲基磺酸(TFMS)法**:这是一种化学去糖基化方法,可以用于释放糖链,尤其在某些难以使用酶法去除糖链的情况下。6.**质谱法**:虽然不是酶,但质谱法是分析糖链结构的强大工具,可以结合酶法或化学法释放的糖链进行详细分析。7.**核磁共振法(NMR)**:NMR技术可以确定糖链的构型、连接位置、分支和微观多样性,是糖链立体化学结构分析的重要方法。这些酶和方法各有优势,可以根据实验的具体需求和糖基化类型的不同进行选择,以获得比较好的分析结果。
EndoS糖苷内切酶S(Endo-S)的特异性主要体现在其对糖蛋白的糖链结构的识别和切割能力上。以下是Endo-S的一些关键特异性特点:1.**糖链识别**:Endo-S能够特异性识别糖链结构中的某些特定序列或结构,尤其是N-连接糖链的壳二糖重要结构。2.**切割位点**:Endo-S在糖链的特定位点进行切割,通常是在N-乙酰葡糖胺(GlcNAc)和天冬酰胺之间的β-N-糖苷键。3.**不影响抗原性**:Endo-S的切割位点选择性高,不会破坏糖蛋白的抗原决定簇,因此在某些应用中可以保持糖蛋白的免疫原性。4.**应用多样性**:Endo-S可以用于多种糖蛋白的去糖基化,包括抗体和其他具有N-连接糖链的蛋白质。5.**研究和药物开发**:在研究糖蛋白的结构和功能时,Endo-S提供了一种工具来研究糖链对蛋白质性质的影响。此外,在药物开发中,Endo-S用于制备糖链定点ADC化合物,通过精确控制药物与抗体的连接点,提高药物的疗效和减少副作用。6.**兼容性**:Endo-S对多样化的LacNAc修饰显示出良好的兼容性,可以接受不同生物正交基团、荧光基团等衍生物作为底物,实现抗体糖基化修饰。7.**高效性**:Endo-S在催化糖链转移或切割反应中表现出高效性,有助于实现高效获得功能修饰的糖工程抗体。
IdeSProtease是一种免疫球蛋白G(IgG)特异性降解酶,它能够在IgG的铰链区下方的一个特定位点进行切割,产生F(ab')2和Fc片段。这种酶是通过大肠杆菌(E.coli)表达系统重组表达生产的,并且经过分子改造,使其具有更高的酶活和更广的底物特异性。在生产过程中,确保IdeSProtease符合GMP(良好生产规范)标准,需要进行以下步骤:1.**分子改造**:通过分子生物学技术对IdeS进行改造,增强其稳定性和比活性。2.**大肠杆菌表达系统**:利用大肠杆菌表达系统进行IdeS的重组表达,确保无动物源性成分,减少病毒污染风险。3.**纯化**:通过高度纯化过程,确保IdeS的纯度达到≥95%。4.**酶活定义**:1个酶活力单位定义为在37°C条件下,30分钟内酶切1μg重组单克隆IgG所需的酶量。5.**质量控制**:每批产品都经过严格的质量控制,以确保产品批间稳定性和高稳定性。6.**储存条件**:采用适当的储存条件,如-30℃至-10℃冻存,确保产品在有效期内保持活性和稳定性。7.**微生物学安全性检测**:进行无菌检测、体内有毒物质的检测、抗生物质残留检测、宿主细胞蛋白残留检测和病毒安全性检测,确保产品符合微生物学安全性要求。
PNGaseF,Recombinant,ExpressedinYeast(酵母重组表达N-糖苷酶F)的高效性体现在以下几个方面:1.**高比活性**:该酶具有高比活性,例如可达到750,000U/mL,这意味着单位体积的酶可以进行更多的反应循环,从而提高去糖基化的效率。2.**快速反应**:与传统PNGaseF相比,某些优化版本的PNGaseF,如FastPNGaseF,能在更短的时间内完成去糖基化,要10分钟。3.**彻底去糖基化**:该酶能迅速且无偏好性地去除几乎所有N-连接的寡糖,包括高甘露糖型、杂合型和复杂型糖链,确保了去糖基化的彻底性。4.**直接分析**:去糖基化后的产物可以直接用于下游的色谱或质谱分析,无需额外的纯化步骤,从而节省时间并提高分析的效率。5.**适用性**:适用于多种糖蛋白的去糖基化,包括抗体、免疫球蛋白、融合蛋白以及其他糖蛋白,增加了该酶的实用性。6.**优化的反应条件**:可以在变性或非变性条件下使用,增加了实验设计的灵活性,并允许在不同条件下优化去糖基化效率。7.**简化的实验流程**:由于酶的高效性,实验流程得以简化,减少了反应体积和酶的使用量,同时保持了反应的灵敏度和重复性。
CRISPR/Cas12a 是一种单一的RNA引导的核酸内切酶,通过CRISPR/Cas9系统为靶向基因组工程提供了新的机会。Recombinant Human MANF
重组人血清白蛋白(rHSA)在药物载体应用中提高药物稳定性和靶向性的机制主要包括以下几点:1.**延长半衰期**:通过与rHSA融合,可以延长药物分子在体内的循环时间。例如,阿必鲁肽(Tanzeum)是GLP-1与HSA的融合蛋白,其半衰期可延长至5天,每周给药一次即可。2.**提高稳定性**:rHSA作为载体,可以保护药物分子不受体内酶解和其他降解因素的破坏,从而提高药物的稳定性。例如,FGF21与HSA融合后,其体外稳定性提升,抗胰蛋白酶降解能力和高温条件下的稳定性增加。3.**改善药代动力学**:rHSA融合蛋白能够改善药物的药代动力学特性,如改变药物的分布和代谢,减少肾脏的损失,从而提高药物在体内的浓度和疗效。4.**增强靶向性**:rHSA可以通过其天然的生物学特性,如与特定受体的结合,增强药物对特定组织或细胞的靶向性。例如,rHSA可以通过其与FcRn受体的结合,实现对瘤组织的靶向性。5.**降低免疫原性**:rHSA作为一种内源性蛋白质,具有较低的免疫原性,可以减少药物引起的免疫反应,提高药物的安全性和耐受性。Recombinant Human MANF
Recombinant Human APOE/Apolipoprotein E(His Tag)
Recombinant Mouse ROBO4 Protein
Recombinant FITC-Labeled Human FOLR1 Protein
Recombinant Human NKG2A&CD94 Protein
Recombinant Human LRRC15/LIB Protein
Recombinant Mouse WISP1 Protein
Recombinant Mouse DSG-2/Desmoglein-2 Protein
碱性磷酸酶
Recombinant Rhesus macaque VEGF R2/KDR Protein
Recombinant Mouse LGMN Protein